ربما ترغب في تغيير طبيعة البروتين لمشروع علمي ، أو ربما قرأت عن الطعام المشوه وتريد أن تعرف كيف يعمل ذلك. التمسخ هو العملية التي يفقد بها البروتين شكله وبنيته بسبب أفعال القوى الخارجية ، بما في ذلك الحرارة والإشعاع والأحماض والمذيبات. عادة ما تفسد المذيبات العضوية طبيعة البروتينات. تعتمد الطريقة الدقيقة التي تفسد بها طبيعة البروتين على البروتين المعين الذي تريد العمل معه ، حيث تتطلب جميعها عوامل تغيير طبيعة مختلفة على مستويات مختلفة. يمكن تغيير طبيعة أي بروتين إذا كنت تعرف ما الذي يجب تغييره في بيئة البروتين.
خطوات
طريقة 1 من 2: تغيير طبيعة البروتين
الخطوة 1. استخدم الحرارة
تعتبر الحرارة إحدى أسهل الطرق وأكثرها شيوعًا لتفسد البروتين. عندما يكون البروتين المعني موجودًا في الطعام ، فإن طهي الطعام ببساطة سوف يفسد البروتينات. يمكن تغيير طبيعة العديد من البروتينات عن طريق تعريضها لدرجة حرارة تزيد عن 100 درجة مئوية (212 درجة فهرنهايت). هذا يسمح للبروتينات بالتخثر وتقليل قابليتها للذوبان.
تعتمد مدة التعرض على ما تتعرض له للحرارة. بيضة ، على سبيل المثال ، قد تطهى في مقلاة على نار متوسطة في خمس دقائق ، في حين أن التحميص قد يستغرق ساعات لينضج في الفرن
الخطوة 2. ضع الكحول
يعطل الكحول الروابط الهيدروجينية التي تحدث بين مجموعات الأميد لرابطة الببتيد. عندما يتعرض البروتين لمحلول كحول ، تشكل جزيئات الكحول روابط جديدة مع سلسلة البروتين. استخدم محلولًا من 70٪ كحول لاختراق جدار الخلية للبكتيريا وتغيير طبيعة البروتين.
يمكن أن تكون الكحولات المركزة خطيرة ، لأنها قابلة للاشتعال وسامة. احرص دائمًا على ارتداء معدات السلامة الكاملة بما في ذلك القفازات وحماية العين ، والتعامل معها في بيئة آمنة يمكن التحكم في درجة حرارتها
الخطوة 3. تغيير الرقم الهيدروجيني
يمكن تفكيك البنية الداخلية للبروتين عندما تكون بيئته شديدة الحموضة أو شديدة القلوية ، حيث إنها تعطل الروابط الأيونية التي تربط جسور ملح البروتين ببعضها البعض. أضف محلولًا حمضيًا أو أساسيًا إلى البروتين. يجب أن تكون البيئة المحيطة عند درجة حموضة أعلى من 10 أو أقل من 4 لتشجيع التمسخ. إذا كنت تُحدث التغيير بالحمض ، فيجب أن يكون الرقم الهيدروجيني بين 2 و 5.
يمكن أن يؤدي تغيير الرقم الهيدروجيني إلى تأين حمض أميني ، اعتمادًا على pKa لكل مجموعة وظيفية في هذا الحمض الأميني. يمكنك أيضًا تأين المجموعة الأمينية أو مجموعة الكربوكسيل الموجودة في الأحماض الأمينية
الخطوة 4. جرب أملاح المعادن الثقيلة
يمكن أن تعطل المعادن الثقيلة الروابط الموجودة في البروتين ، مما يؤدي إلى فقد بنيتها. يمكن استخدام أملاح المعادن الثقيلة مثل الزئبق والرصاص لتغيير طبيعة البروتينات المختلفة. تتوفر هذه الأملاح من معظم موردي المواد الكيميائية ، ويجب دائمًا استخدامها بحذر ومعدات أمان مناسبة بما في ذلك القفازات وأدوات حماية العين.
يمكن أن تتفاعل المعادن الثقيلة مع مجموعات السلاسل الجانبية الوظيفية للبروتين لتشكيل معقدات. تعمل المعادن الثقيلة أيضًا على أكسدة سلاسل الأحماض الأمينية الجانبية للبروتين
طريقة 2 من 2: تجديد البروتينات
الخطوة 1. تحديد ما إذا كان البروتين يمكن إعادة طيه
بعض أشكال التمسخ تكون دائمة ، بينما يمكن التراجع عن البعض الآخر. لا يمكن التراجع عن طهي بيضة أو لحم ، على سبيل المثال ، ولكن البروتين الذي تعرض لدرجة حموضة عالية قد يستعيد شكله عند وضعه في بيئة أكثر حيادية.
ما إذا كان البروتين يمكن إعادة طيه أم لا يعتمد على الحمض النووي الخاص به. سيحتفظ الحمض النووي بالمعلومات اللازمة لعودة البروتين إلى حالته الأصلية
الخطوة 2. قم بإزالة عامل تغيير الطبيعة
أعد البيئة المحيطة بالبروتين إلى حالة ركود وأزل عنصر تغيير الطبيعة. أزل الحمض أو القاعدة ، على سبيل المثال ، أو أعد البروتين إلى درجة حرارة معقولة.
الخطوة 3. استخدم مجموعة إعادة التشبع
تبيع العديد من شركات مستلزمات المعامل مجموعات إعادة التشبع التي تسمح لك بفحص أفضل المعلمات لتشجيع إعادة التشبع. يمكن أن تكون هذه المجموعات مفيدة بشكل خاص إذا كنت تبحث عن البروتينات في المختبر أو في بيئة تجريبية.
نصائح
- يفقد البروتين المشوه هيكله الرباعي والثالثي والثانوي الظاهر في حالته الأصلية ، لكن هيكله الأساسي سيبقى.
- يفقد البروتين المشوه أيضًا بعضًا من نشاطه الحيوي ، وفي بعض الحالات ، كما هو الحال مع الإنزيمات ، يفقد قدرته على العمل. على سبيل المثال ، قد لا تكون الركائز قادرة على الارتباط بالإنزيمات التي تم تغيير طبيعتها.
- قد يفقد البروتين المشوه قابليته للذوبان في محلول.
- يمكنك أيضًا تغيير طبيعة الأحماض النووية باستخدام تقنيات معملية لفصل الخيوط.
